可見分光光度計是一種結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束分光光度計,基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進行定性和定量分析。
其定量分析根據(jù)相對測量原理工作,即選定樣品的溶劑(或空氣 )作為標(biāo)準(zhǔn)試樣,設(shè)定其透射比為100%,被測樣品的透射比則相對于標(biāo)準(zhǔn)試樣(或空氣)而得到。
當(dāng)一束單色光照射待測物質(zhì)的溶液時,當(dāng)某一定頻率(或波長)的可見光所具有的能量(hf)恰好與待測物質(zhì)分子中的價電子的能級差相適應(yīng)(即ΔE=E2-E1=hf)時,待測物將對該頻率(波長)的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見分光光度計可以測量和記錄其吸收程度(吸光度)。
由于在一定條件下,吸光度A與待測物質(zhì)的濃度C及吸收地長度l的乘積成正比,即A= KCL,所以,在測得吸光度 A后,可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進行定量分析。
下面讓我們一起來了解一下可見分光光度計的使用方法吧
(1)開機預(yù)熱
儀器接通電源,微機進行系統(tǒng)自檢,LCD顯示窗口顯示相應(yīng)的產(chǎn)品型號后,儀器進入工作狀態(tài)。默認的工作模式是T 。
注意:為使內(nèi)部達到熱平衡,開機預(yù)熱時間不小于30 分鐘。
(2)改變波長
通過旋轉(zhuǎn)波長手輪改變波長,并在波長觀察窗的刻度選擇所需的波長。
(3)放置參比與待測樣品
選擇測試用的比色皿,把盛放參比和待測液的樣品放入樣品架內(nèi),通過樣品架拉桿來選擇樣品的位置。當(dāng)拉桿到位時有定位感,到位時輕輕推拉一下以保證定位的正確。
(4)調(diào)0%T、調(diào)100%T/0A
為保證儀器進入正確的測試狀態(tài),在儀器改變測試波長和測試一段時間后可通過按0%鍵和100%/0A鍵對儀器進行調(diào)零和調(diào)滿度、吸光度。
(5)顯示方式的選擇
a. T 透射比
b. A 吸光度
c. C 濃度
d. F濃度因子